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Vorbestellen	Zweigstelle: 07., Urban-Loritz-Pl. 2a	Standorte: NN.BD Gstr / College 6a - Naturwissenschaften	Status: Verfügbar	Frist:	Vorbestellungen: 0
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Dieses Lehr- und Methodenbuch soll Studierenden der Biologie, Medizin, Pharmazie oder Biotechnologie wie auch Wissenschaftler*innen und technischen Assistent*innen einen umfassenden Einblick in die Zell- und Gewebekultur vermitteln. Praktische Tipps und Tricks in einer labor- und leserfreundlichen Aufmachung dienen dazu, die tägliche Routine im Zellkulturlabor zu erleichtern. Es sind vor allem die leicht nachvollziehbaren "Man-nehme"-Vorschriften, die den praktischen Wert des Buches ausmachen und zu weiterführenden experimentellen Ansätzen anregen. Exemplarisch werden die wichtigsten Grundoperationen in der Zellkultur behandelt, sodass sich auch Anfänger bei der Kultivierung tierischer und pflanzlicher Zellen gut mithilfe des Buches einarbeiten und informieren können. Der Info-Anhang enthält stöchiometrische Rechenbeispiele, ein umfangreiches Glossar, weiterführende Literaturhinweise und Adressen von Lieferfirmen mit Internetadressen.

 

Die 8. Auflage wurde wieder gründlich überarbeitet und auf den letzten Stand von Wissen und Technik gebracht. Die theoretischen Grundlagen wurden verstärkt herausgearbeitet und relevante Gesetzesvorschriften aktualisiert. Beibehalten wurde auch die Grundstruktur dieses Labor-"Klassikers", mit folgenden wichtigen Themen: Allgemeine Grundlagen der Zell- und Gewebekultur Die Zelle und ihre Umgebung Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen Spezielle Methoden und Anwendungen Pflanzenzellkultur Die neuesten Entwicklungen in der Zell- und Gewebekultur, die dreidimensionale Zellkultur, die Kultivierung von Organoiden und Miniorganen wie auch mikrophysiologische Systeme "on Chips" werden in einem neu gestalteten Kapitel ausführlich beschrieben. Ebenfalls neu gestaltet und aktualisiert wurde der Abschnitt zur Kultivierung von Stammzellen. Der Abschnitt über die in vitro-toxikologischen Ansätze wurde ergänzt und aktualisiert. Bereits in der 7. Auflage wurde auf die Einhaltung höchster Qualitätsstandards in der Zell- und Gewebekultur besonders hingewiesen. Leider finden sich bis heute immer noch die altbekannten "offenen Baustellen": zum einen die immer noch fehlende Authentifizierung humaner Zelllinien, verbunden mit einem Qualitätsmanagement, um Kontaminationen mit Mycoplasmen und Kreuzkontaminationen zu vermeiden bzw. rechtzeitig zu entdecken, zum anderen die weitere Verwendung von fetalem Kälberserum endlich zu reduzieren oder gänzlich zu vermeiden. Hierzu finden sich ausführliche praktische Anleitungen.

 

Die Autoren Univ.-Prof. Dr. Gerhard Gstraunthaler war jahrelang als Titularprofessor am Institut für Physiologie der Medizinischen Universität Innsbruck tätig. Seine Spezialgebiete sind: Zellphysiologie, epitheliale Zell- und Gewebekultur, Nierenbiochemie, Alternativen zum Fetalen Kälberserum, Serumfreie Zellkultur, induzierte pluripotente Stammzellen (iPSC), Ersatzmethoden zu Tierversuchen.

 

Prof. Dr. Toni Lindl lehrte an der Fachhochschule Weihenstephan und gründete bereits 1981 das private Institut für angewandte Zellkultur (I-A-Z, Dr. T. Lindl, GmbH) in München. Zu seinen Spezialgebieten gehört: Pflanzenzellkulturen, tierische und humane Zellkulturen, Zellphysiologie und Zelltoxikologie, Alternativmethodenentwicklung zum Tierversuch, Alternativen zum fetalen Kälberserum, serumfreie Medien, humane Thrombocytenlysate.

 

 

Aus dem Inhalt:

I Allgemeine Grundlagen der Zell-und Gewebekultur / / 1 Das Zellkulturlabor: Räumliche und apparative Voraussetzungen 3 / 1.1 Der Reinigungsbereich 5 / 1.2 Der Vorbereitungs-und Verarbeitungsbereich 5 / 1.3 Der Sterilbereich 5 / Weiterführende Literatur 14 / / 2 Steriltechnik-Kontaminationen 15 / 2.1 Der Sterilbereich 16 / 2.2 Laborreinigung 18 / 2.3 Hygiene 18 / 2.4 „Aseptische" Arbeitstechnik 18 / 2.5 Sterilisationsverfahren 21 / 2.6 Antibiotika (Verwendung von Antibiotika in der Zellkultur) 29 / 2.7 Mycoplasmen 32 / 2.8 Kreuzkontaminationen 43 / Weiterführende Literatur 49 / / 3 Sicherheit in der Zellkultur 53 / 3.1 Sicherheitsvorschriften 54 / 3.2 Gesetzliche Regelwerke 55 / 3.3 Entsorgung 58 / Weiterführende Literatur 60 / / II Die Zelle und ihre Umgebung / / 4 Zellbiologische Grundlagen der Zell-und Gewebekultur 63 / Weiterführende Literatur 65 / / 5 Kulturgefäße und ihre Behandlung 67 / 5.1 Züchtung von Zellen auf Glas 68 / 5.2 Züchtung von Zellen auf Plastikmaterial 69 / 5.3 Züchtung von Zellen auf anderen Materialien 71 / 5.4 Spezielle Kulturgefäße 71 / 5.5 Reinigung und Vorbehandlung von Glaswaren 76 / 5.6 Vorbehandlung von Kulturgefäßen mit Polylysin oder mit Komponenten der extrazellulären Matrix zur Modifizierung der Oberflächeneigenschaften 79 / Weiterführende Literatur 85 / / 6 Zellkulturmedien 87 / 6.1 Zusammensetzung der Medien 92 / 6.2 Kurze Beschreibung der gebräuchlichsten Kulturmedien 104 / 6.3 Herstellung gebrauchsfertiger Medien 107 / Weiterführende Literatur 113 / / 7 Serumfreie Zellkultur 115 / 7.1 Grundmedien 118 / 7.2 Zusätze zu serumfreien Medien 118 / 7.3 Modularer Aufbau serumfreier Medien 119 / 7.4 Übergang von serumhaltigen zu serumfreien Medien 120 / 7.5 Serumfreie und proteinfreie Kulturmedien 123 / Weiterführende Literatur 123 / / 8 Physiologische Zellkulturparameter 125 / 8.1 Osmolarität 126 / 8.2 Temperatur 126 / 8.3 Oxygenierung 126 / 8.4 pH-Wert und Pufferung 127 / Weiterführende Literatur 129 / / 9 Reinstwasser für Zell-und Gewebekulturen 131 / 9.1 Verfahren der Aufbereitung, Vorbehandlung 132 / 9.2 Reinstwasseraufbereitungssysteme 133 / 9.3 Lagerung von Reinstwasser 134 / 9.4 Wasser für Reinigungszwecke 134 / Weiterführende Literatur 135 / / III Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen / / 10 Mediumwechsel und Fütterungszyklen 139 / 10.1 Mediumwechsel bei Monolayerkulturen 140 / 10.2 Mediumwechsel bei Suspensionskulturen 142 / Weiterführende Literatur 143 / / 11 Subkultivierung/Passagieren 145 / 11.1 Subkultivierung von Monolayerkulturen 146 / 11.2 Subkultivierung von Suspensionskulturen 153 / Weiterführende Literatur 154 / / 12 Bestimmung allgemeiner Wachstumsparameter 155 / 12.1 Mikroskopische Betrachtung der Kulturen 156 / 12.2 Bestimmung der Zellzahl (und Zellmasse) 156 / 12.3 Bestimmung allgemeiner Stoffwechselparameter 165 / 12.4 Vitalitätstests 165 / Weiterführende Literatur 172 / / 13 Einfrieren, Lagerung und Versand von Zellen 173 / 13.1 Einfrieren von Zellen 174 / 13.2 Lagerung der Zellen 177 / 13.3 Auftauen von Zellen 178 / 13.4 Versand von Zellen 179 / Weiterführende Literatur 181 / / 14 Qualitätskontrolle und Cell Banking 183 / 14.1 Qualitätskontrolle 184 / 14.2 Cell Banking 185 / Weiterführende Literatur 185 / / 15 Standardisierung in der Zellkultur (Good Cell Culture Practice) 187 / Weiterführende Literatur 189 / / / IV Spezielle Methoden und Anwendungen / / 16 Allgemeine Aspekte der Primärkultur 193 / 16.1 Anlegen einer Primärkultur 194 / 16.2 Etablierung einer Zelllinie, Zellalterung und Seneszenz 197 / 16.3 Apoptose in der Zellkultur 201 / 16.4 Transformation und Immortalisierung 202 / Weiterführende Literatur 206 / / 17 Spezielle Primärkulturen 209 / 17.1 Kultivierung von Herzmuskelzellen des Hühnchens 210 / 17.2 Kultivierung von Herzmuskelzellen aus neonatalen Rattenherzen 211 / 17.3 Primärkulturen aus frischen Hautproben (Biopsien) menschlichen Ursprungs 212 / 17.4 Isolierung von Lymphocyten aus Vollblut mittels Dichtegradientenzentrifugation 212 / 17.5 Primärkulturen aus Mäusecerebellum (Kleinhirn) 214 / 17.6 Primärkulturen von Hepatocyten 216 / 17.7 Isolierung und Primärkultur von Endothelzellen 219 / 17.8 Gewinnung einer Zellkultur aus soliden Humantumoren 222 / 17.9 Gewinnung von Keratinocyten 224 / Weiterführende Literatur 226 / / 18 Kultivierung spezieller Zelllinien 229 / 18.1 Mammaliazelllinien 232 / 18.2 Kaltblütige Vertebraten 244 / 18.3 Invertebraten 245 / 18.4 Insektenzellen für die biotechnologische Produktion rekombinanter Proteine (Sf9-Zellen aus Spodoptera frugiperda) 246 / Weiterführende Literatur 249 / / 19 Spezielle zellbiologische Methoden in der Zellkultur 251 / 19.1 Transfektion 253 / 19.2 Klonieren 259 / 19.3 Zellfusion, Hybridomatechnik 262 / 19.4 Zellsynchronisation 269 / 19.5 Cytometrie/Cell Sorting 274 / 19.6 Versuche zur (n-v/tro-Toxizität 280 / 19.7 Migrationsassays 294 / 19.8 Chromosomenpräparation 299 / Weiterführende Literatur 300 / / 20 Organkulturen, 3D-Kulturen, Organoide und mikrophysiologische Systeme (Organ-on-Chips) 303 / 20.1 Organkulturen 304 / 20.2 Dreidimensionale (3D-)Kulturen, Organoide und 3D-Biodruck 311 / 20.3 Mikrophysiologische Systeme (Organ-on-Chips) 321 / Weiterführende Literatur 324 / / 21 Stammzellen 327 / 21.1 Embryonale Stammzellen 328 / 21.2 Induzierte pluripotente Stammzellen (iPSC) 329 / 21.3 Adulte Stammzellen 330 / 21.4 Embryonaler-Stammzell-Test (EST) (Spezies: Maus) 336 / Weiterführende Literatur 346 / / 22 Zellkultur im großen Maßstab, Automatisierung 349 / 22.1 Monolayerkulturen für große Zellmengen 350 / 22.2 Suspensionskultur für große Zellmengen 355 / 22.3 Automatisierung in der Zellkultur 358 / Weiterführende Literatur 360 / / V Pflanzenzellkultur / / 23 Pflanzenzell- und Gewebekultur 365 / 23.1 Herstellung von Kulturmedien 366 / 23.2 Kalluskulturen 370 / 23.3 Suspensionskulturen 373 / 23.4 Isolierung von Protoplasten aus Pflanzenzellkulturen 374 / 23.5 Antherenkultur 378 / 23.6 Embryonenkultur 380 / 23.7 Einfrieren und Lagerung von Pflanzenzellkulturen 380 / Weiterführende Literatur 382 / / Serviceteil / A Glossar (Kleines Zell- und Gewebekulturlexikon) 386 / B Anhang 406 / C Lieferfirmen und Hersteller 419 / Stichwortverzeichnis 427